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首頁(yè) > 產(chǎn)品中心 > 食品安全檢測  >  試劑盒  >  快速RNA免核酸提取PCR檢測試劑盒

快速RNA免核酸提取PCR檢測試劑盒

簡(jiǎn)要描述:本試劑盒中采用du特配方,能夠快速高效的裂解各種常見(jiàn)樣本,無(wú)需重復離心便可獲得高質(zhì)量的病毒RNA,適用于RT-PCR的高特異性檢測。本產(chǎn)品可用于細胞培養液、血液、血清中病毒RNA的提取。

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠(chǎng)商性質(zhì):生產(chǎn)廠(chǎng)家
  • 更新時(shí)間:2023-04-27
  • 訪(fǎng)  問(wèn)  量:635
詳情介紹

快速病毒RNA免核酸提取PCR檢測試劑

 

試劑盒簡(jiǎn)介:本試劑盒中采用du特配方,能夠快速高效的裂解各種常見(jiàn)樣本,無(wú)需重復離心便可獲得高質(zhì)量的病毒RNA,適用于RT-PCR的高特異性檢測。本產(chǎn)品可用于細胞培養液、血液、血清中病毒RNA的提取。

試劑盒組成

組分

M-DNA01

RNA-Lysis

         1.5 mL      50T

2×one step  RT- PCR Mix

500 μL       ( 50T )

one step Enzyme  Mix

50 μL         ( 50T )

樣品稀釋液

20  ml         ( 50T )

 

保存-20oC 保存,保存期一年。

注意:使用前將RNA-Lysis室溫充分混勻。

準備的儀器:離心機、移液器、PCR儀

 

使用方法

一、 樣品的處理方法

1.少量樣本處理方法

1吸取15μL樣本放入1.5ml離心管中。

2)加入25 μL RNA Lysis。

3)充分混勻,室溫靜置5分鐘,加入350µL樣品稀釋液混勻。

410,000rpm離心1分鐘,1-2μL作為PCR反應模板。

2.大量樣本處理方法

1分別吸取15μL不同的樣本依次放入8聯(lián)管中。

2)加入25 μL RNA Lysis。

3)充分混勻,室溫靜置5分鐘,10,000rpm離心1分鐘。

4分別從(3)中吸取10μL處理后樣品依次加入一新的8聯(lián)管。

5每孔分別加入90µL樣品稀釋液混勻。取1-2μL作為熒光PCR反應模板。

 

二、在RNase free 的離心管中配制PCR反應體系

PCR反應體系

20 μL體系(推薦)

2×one step  RT- PCR Mix

10 μL

one step Enzyme  Mix

1 μL

Forward Primer (10 μM)

0.4-1μL

Reverse Primer (10 μM)

0.4-1 μL

Template RNA

1-2 μL

ddH2O

補足至20 μL

 

 

三、反應程序

溫度

時(shí)間

循環(huán)數

50oC

30min

1

94oC

3min

1

94oC

30sec

 

35-40

Tm

30sec

72oC

0.5-1min/kb

72oC

7min

1

4oC

--

1

 

注意事項

1)在進(jìn)行大量樣品檢測時(shí),可將本試劑盒的試劑預分裝到8聯(lián) PCR管,用多通道移液器進(jìn)行多樣本的處理。

2)取樣的細胞量應當適中,濃度不宜過(guò)高或過(guò)低,處理后溶液應當以透明為宜。擴增病毒基因時(shí)需要根據病毒的滴度決定取樣的細胞數量。

3)樣品處理過(guò)程中應當防止交叉污染,推薦設置陰性樣品參與處理過(guò)程,以檢測環(huán)境的污染。

4)PCR的退火溫度可根據引物的預測Tm值減去5℃,或者通過(guò)梯度PCR摸索最佳退火溫度。

5)用本試劑盒處理的樣品可于-20℃保存 1個(gè)月。

6)為防止試劑盒污染,請勿將不同批號試劑盒混用。

 


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